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檢測試劑盒在實際測定操作中要注意以下幾點

更新日期: 2021-08-30
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  檢測試劑盒原理,DNA包被特殊處理帶有高DNA親和性的微孔闆上,8-OHdG通過捕獲抗體和檢測抗體來檢測.通過酶标儀可以檢測結果.大量得8-OHdG與光密度值成比例。
 
  檢測試劑盒實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做标準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測範圍。
 
  實驗原理:本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。向預先包被了抗體的酶标孔中加入樣本,再加入生物素标記的識别抗原,在三十七度下孵育三十分鐘,兩者與固相抗體競争結合形成免疫複合物,經PBST洗滌除去未結合的生物素抗原,然後加入親和素-HRP,親和素-HRP與生物素抗原結合,洗滌後結合的HRP催化TMB成藍色,随後在酸的作用下轉化成黃色,在一定波長下有吸收峰,吸光值與樣本中抗原的濃度成負相關。
 
  檢測試劑盒具有敏感性高,特異性強,快速等特點,目前廣泛應用于農獸藥、真菌殘留檢測,該方法從加樣、洗闆、顯色到讀數步驟繁多,其中任何一步控制不好都可能影響檢測結果的準确性。因此,在實際測定操作中要注意以下幾點。
 
  1.試劑盒回溫
 
  檢測試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來後,先不要急于打開試劑盒,要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無冷凝水,檢測所用的試劑需充分混勻且*溶解後再用,提前1~2小時取出試劑盒,放在室溫中;或在預設25℃恒溫培養箱中平衡30分鐘~60分鐘。
 
  2.環境溫度的控制
 
  1)實驗室應配備溫濕度表,且确保定期計量。
 
  2)根據天氣情況設定實驗室空調制冷或加溫功能,待室溫穩定且無幹擾的條件下再開始檢測流程。
 
  3)選用帶溫控裝置的孵育儀器,如恒溫孵育器、恒溫培養箱、多功能酶标儀等。注意要提前開啟預熱。
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