柱式病毒DNA-RNA雙提取試劑盒是在柱式病毒 DNAout 的基礎上開發的、專門用于從血清(血漿) 等液體樣品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、陰道拭子等)中提取微量病毒 DNA 和 RNA 的産品,它具有下列特點:
1. 本産品可用于病毒 RNA、病毒 DNA 提取以及 DNA 和 RNA 雙提取。
2. 操作簡單,整個過程隻需要 20 分鐘左右。
3. 靈敏度高,通過 PCR 檢測到的終靈敏度可以達到 30-50 拷貝/mL。
4. 安全無毒。
5. 與 PCR 和熒光 PCR 兼容。所得 DNA 可用于 PCR、酶切等實驗;RNA 可用于 RT-PCR 和 Northern 雜交等實驗。
6. 價廉物美,性價比遠高于國外同類産品。
7. 适用于各種材料,包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養細胞上清液等無 細胞材料。
常溫運輸及保存,有效期一年。
1. 對于液體病毒樣品:在 1.5 mL 離心管中加入 0.1-0.2 mL 液體病毒樣品。如果 病毒需要富集,可以将 1.5 mL 液體在 4℃ 24,000 g 冷凍離心 60 分鐘,移棄 1.3 mL 後剩下的 0.2 mL 用于第 2 步處理。 對于拭子樣品:将一個拭子放入離心管中,加入 1mL 自備的生理鹽水,振蕩器 上充分振蕩半分鐘,然後轉移 0.2 mL 到 1.5 mL 塑料離心管中,用于第 2 步處 理。
2. 加入 0.6 mL 溶液 A 得到的 0.2 mL 樣品中,振蕩 30 秒混勻後室溫放 置 10 分鐘。注意:溶液 A 在 4℃放置後可能會産生沉澱,使用前必須放在 65℃ 水浴使沉澱*溶解并充分搖勻後再取用。
3. 短暫離心後将 500 uL 溶液轉移到離心吸附柱中,室溫放置 2 分鐘。
4. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集 管中。
5. 将剩餘溶液短暫離心後全部轉移到步驟 3 的離心吸附柱中,室溫放置 2 分鐘。
6. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集 管中。
7. 加入 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12,000 rmp 室溫離心 1 分鐘,棄收 集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集管中。
8. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘(幹甩),棄含穿透液的離心管。
9. 将幹甩後的離心吸附柱套入到一個自備的 RNase-free 的 1.5 mL 離心管中,在 離心吸附柱的濾膜的中部加入 30-100 uL 洗脫液,然後室溫放置 2 分鐘。
10. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,離心管中的溶液即為病毒 DNA 和 RNA 溶液。
11. 所得溶液可以直接用于 PCR、RT-PCR 等實驗,也可放-20℃長期保存備用。
柱式病毒DNA-RNA雙提取試劑盒